Wykorzystanie przeprogramowanych komórek do identyfikacji terapii brodawczaka oddechowego AD 5

Komórki nowotworowe płuc zawierały około 40 wirusowych genomów na komórkę. Nieco zaskakujące, analiza PCR wykazała, że pierwotny guz krtaniowy nie zawiera zmutowanego genomu wirusowego. Aby potwierdzić, że w miejscu krtani brakuje tego zmutowanego genomu, użyliśmy RCA do amplifikacji i sekwencjonowania genomu wirusowego z krtani. Wygenerowany genom HPV-11 (numer dostępu do GenBank, JN644142) miał rozmiar prototypu 7933 bp, co sugeruje, że duplikacja nastąpiła podczas rozszerzania się nowotworu do płuc. Genomy HPV obecne w płucach i krtani, oprócz różnej wielkości genomu, zawierały kilka mutacji w całym genomie, które różnią się od sekwencji prototypowej HPV-11 (Tabela S1 w dodatkowym dodatku). Identyfikacja Vorinostatu jako środka terapeutycznego
Rysunek 3. Rysunek 3. Czułość komórek nowotworowych płuc na trzy wybrane leki. Prawidłowe komórki płuc i komórki nowotworu płuc traktowano cydofowirem (Panel A), dihydroartemizininą (Panel B) lub vorinostatem (Panel C) we wskazanych stężeniach przez 48 godzin. Żywotność komórek zmierzono przy użyciu testu CellTiter-Glo Luminescent Cell Viability Assay. Vorinostat miał medyczną leczniczą dawkę 4,2 .M w komórkach nowotworowych (95% przedział ufności [CI], 3,2 do 5,4) wobec 15,9 .M w prawidłowych komórkach (95% CI, 13,2 do 19,2), z selektywnością w kierunku komórek nowotworowych w porównaniu do prawidłowych (P <0,001). Panel D pokazuje obrazy z obliczonego obrazu tomograficznego reprezentatywnej masy guza płuca w prawym dolnym płatku przed i po trzymiesięcznym okresie leczenia worynolostatem. Masa ta pozostała zmniejszona 9 miesięcy później, po zakończeniu rocznego cyklu terapii.
Ponieważ nie ma skutecznych terapii w leczeniu guzów płuc u pacjentów z nawracającą brodawczakowatością dróg oddechowych i choroba postępowała szybko u tego pacjenta, wykorzystaliśmy wygenerowane hodowle komórek płucnych HPV-11 w celu zbadania potencjalnych terapii lekowych. Do oceny wybraliśmy cydofowir, dihydroartemisinin i vorinostat. Cydofowir, najpowszechniej stosowany lek w leczeniu nawracającej brodawczakowatości dróg oddechowych, był podawany pacjentowi bezskutecznie. Wykazano, że zarówno dihydroartemisinin jak i vorinostat są skuteczne przeciwko liniom komórek rakowych dodatnich pod względem HPV16. Cydofowir (Figura 3A) był nieskuteczny in vitro nawet w bardzo wysokich stężeniach (50 do 200 .M), co odpowiada brakowi tego pacjenta. Dihydroartemizinina wykazywała umiarkowane zabijanie komórek nowotworowych (Figura 3B), ale wymagane dawki były znacznie wyższe niż te stosowane w komórkach raka szyjki macicy7. Vorinostat jest inhibitorem deacetylazy histonowej, który jest zatwierdzony przez Food and Drug Administration do leczenia chłoniaka skórnego z komórek T, 8 i podobne inhibitory okazały się toksyczne dla komórek raka szyjki macicy dodatnich pod względem HPV. 9 Stwierdziliśmy, że mediana leczniczej dawki vorinostatu wynosiła 4,2 .M dla komórek nowotworowych i 15,9 .M dla normalnych komórek (Figura 3C), z selektywnością dla komórek nowotworowych. nad normalnymi komórkami.
Na podstawie danych dotyczących wrażliwości in vitro, pacjent był leczony worynocostatem (w dawce 400 mg na dobę), podawany w 4-tygodniowych cyklach (3 tygodnie w tygodniu i tydzień w tygodniu) przez rok
[przypisy: zespół aspergera warszawa, vitamarin, tania apteka internetowa ]